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詹姆斯生于纽约,1861年进入哈佛大学劳伦斯理学院学习化学、比较解剖学和生理学,1864年转入该校医学院。1865年随同著名生理学家阿加西斯去巴西进行自然考察。1867年又去德国留学,在赫尔姆霍茨、冯特、微尔和的指导下学习医学、生理学和心理学。1869年在哈佛大学获医学博士。1872年在该校讲授生理学和解剖学。由于研究神经生理以及与心理学有关的其他生理学问题,他逐渐转向心理学的研究。1875-1876年他在美国第一个开设心理学课程,生理学和心理学的关系。1875年他还设计了一个小型心理学实验室供教学演示之用。